中高壓制備色譜結(jié)構(gòu)設(shè)計合理
中高壓制備色譜可以滿足您更多的純化制備需求。您可以通過模塊部件的自由組合來個性化定制您需要的系統(tǒng),從而滿足您*的實驗室 要 求。
中高壓制備色譜系統(tǒng)大流速可達1000 ml/min,保證了百毫克級樣品的純化分離,在使用過程中,存在一些誤區(qū),本文就介紹下其中一個誤 區(qū),即很多人認為保護柱不影響分離效果,這其實是錯誤的。
中高壓制備色譜配一個保護柱很好,如果固定相選擇錯誤,保護柱也能夠?qū)Ψ蛛x有效果,要明確的是保護柱是保護分析柱避免被高 殘留的 組分污染用的,尤其是那些不想進讓它柱子的部分,保護柱比起分析柱便宜許多,所以污染的保護柱能夠替換的更加勤。
理想的結(jié)果是,中高壓制備色譜的固定相和分析柱恰好相同。如果固定相保留強(如高載碳量和混合相),就能夠使得保留便宜而影響 分離 ,甚至導(dǎo)致不同的選擇性。如果保留弱,問題就不那么明顯,除非固定相影響整個體系選擇性。
為了使保護柱小化的影響分離,保護柱需要合適的裝配。顯然,保護柱安插在進樣口和分析柱之間,但是如果管路太長(太長或者內(nèi)徑太大 ),就會造成額外的峰展寬,從而影響分離。中高壓制備色譜引入整合保護柱,從以往的報道看,基本上會達到分析柱的水平。但是,中高壓制 備色譜基本上和卡式色譜柱捆綁,因此不是那么流行。從操作的角度說,應(yīng)當在不影響HPLC系統(tǒng)的前提下容易卸下和更換。
理論上,如果保護柱延長了柱長,那么就對中高壓制備色譜有額外的塔板數(shù)。但就像前面說的,保護柱要么在條件使用,要么在糟糕的條件下除去。所以保護柱的優(yōu)勢就是延長柱壽命,而沒有帶來總體分析效率的 提高。
中高壓制備色譜由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,可采用 厚壁玻璃或石英管,管內(nèi) 壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。中高壓制備色譜兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20μm(5~10μm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。